腹瀉性貝類毒素酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒

腹瀉性貝類毒素檢測(cè)試劑盒的原理是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法，用于水及水產(chǎn)品中腹瀉性貝類毒素的定量測(cè)定。岡田酸是腹瀉性貝類毒素的一種。對(duì)于水產(chǎn)品需要做前處理，不可以直接檢測(cè)。如果需要的話陽(yáng)性樣品可以通過(guò)HPLC和GC/MS來(lái)驗(yàn)證。

2.安全性說(shuō)明書(shū)

試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)溶液里含有少量的岡田酸。底物中包含有四甲基聯(lián)苯胺，終止液中含有稀硫酸。要避免皮膚和粘膜與終止液接觸，如果不小心接觸了請(qǐng)馬上用水沖洗。

3．保存和穩(wěn)定性

試劑盒應(yīng)保存在2-8℃，不要冷凍。在使用之前要把試劑盒中的溶液回復(fù)到室溫（20-25℃）。有效期內(nèi)試劑盒中的試劑都可以使用。

4．原理

試劑盒的原理是直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法，通過(guò)特異性抗體來(lái)識(shí)別岡田酸。當(dāng)樣品中含有岡田酸時(shí)，樣品中的岡田酸與岡田酸酶結(jié)合物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合溶液中的岡田酸抗體。岡田酸抗體與包被在微孔板上的羊抗鼠二抗結(jié)合。經(jīng)過(guò)一步洗滌加入底物溶液，產(chǎn)生有色反應(yīng)。產(chǎn)生的綠色的顏色深度與樣品中岡田酸的含量成反比。加入反應(yīng)停止液后使顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)定吸光度值。通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)計(jì)算樣品中岡田酸的含量。

5. 岡田酸試劑盒的局限性和可能的干擾

對(duì)在水樣中經(jīng)常出現(xiàn)的多種有機(jī)物和無(wú)機(jī)物已近作過(guò)檢測(cè)對(duì)此試劑盒并無(wú)干擾。由于化合物的易變質(zhì)性由基質(zhì)反應(yīng)引起的干擾是不可能完全避免的。操作不當(dāng)也可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果錯(cuò)誤，比如：試劑盒保存條件不對(duì)、錯(cuò)誤的加液順序、試劑的量沒(méi)有加準(zhǔn)確、孵育的時(shí)間太長(zhǎng)或太短、孵育的溫度太高或太低。與其它檢測(cè)方法一樣對(duì)陽(yáng)性結(jié)果要求通過(guò)其它傳統(tǒng)的方法來(lái)驗(yàn)證。

6．岡田酸測(cè)定的重要性

岡田酸是腹瀉性貝類毒素的一種，受岡田酸污染的貝類和有害藻類大量繁殖的有關(guān)。DSP可以引起劑量依賴型的腹瀉、惡心、嘔吐癥狀。FDA對(duì)ASP的限量是0.2ppm。歐洲是160ug。這個(gè)試劑盒可以檢測(cè)40個(gè)樣品（做兩個(gè)重復(fù)）。需要少量的樣品，檢測(cè)時(shí)間少于2小時(shí)。

7．試劑盒特性

敏感性：0.1ng/ml

重復(fù)性：標(biāo)準(zhǔn)的變異系數(shù)小于10%，樣品的變異系數(shù)小于15%

特異性：

腹瀉性貝類毒素檢測(cè)試劑盒能檢測(cè)Okadaic acid及其它DSP，它們的結(jié)合程度是不同，以下表格中展示的是相關(guān)值及交叉反映率（%CR），以下所有濃度均為ppb級(jí)。