蛋白中的色氨酸和酪氨酸可以被280 nm的紫外光激發并釋放出熒光，其熒光性質與所處的微環境密切相關。蛋白變性過程中，色氨酸從疏水的蛋白內部逐漸暴露到溶劑中，熒光釋放的峰值也從330 nm逐漸轉移到350 nm。
內源差示掃描熒光技術（intrinsic fluorescence DSF），通過檢測溫度變化/變性劑濃度變化過程中蛋白內源紫外熒光（350 nm/330 nm比值）的改變，獲得蛋白的熱穩定性(Tm值)、化學穩定性（Cm值）等參數。相比傳統的方法，無需添加染料，通量高，樣品用量少，數據精度高。
蛋白質穩定性分析儀PSA-16是一款無需加入熒光染料、高通量、低樣品消耗量檢測蛋白質穩定性的設備。該設備基于內源差示掃描熒光技術（intrinsic fluorescence DSF），通過檢測溫度變化/變形劑濃度變化過程中蛋白內源紫外熒光的改變，獲得蛋白質的熱穩定性(Tm值)、化學穩定性（Cm值）等參數。可應用于蛋白緩沖液條件篩選及優化、小分子與蛋白結合情況的定性測定、蛋白質修飾及改造后的穩定性測定、蛋白變/復性研究、不同批次間蛋白穩定性對比等多個方面。
基于內源差示掃描熒光技術（intrinsic fluorescence DSF），在無需添加外源染料的條件下，對蛋白進行升溫變性，通過內源熒光和散射光的變化與三級結構變化的關系，PSA-16可用于測定不同buffer中蛋白的Tm值變化，獲得蛋白質正確折疊的ZUI YOUbuffer條件；測定不同detergent條件下膜蛋白Tm值，進行detergent篩選；測定不同添加劑對蛋白穩定性的影響；測定添加配體后Tm值變化進行配體結合篩選；測定蛋白中變性部分的比例，進行質量控制；測定蛋白Tm值與濃度的相關性，獲得ZUI YOU的蛋白濃度進行后續結晶等實驗；測定蛋白去折疊過程，進行蛋白復性條件篩選；測定蛋白folding enthalpy，研究蛋白的長期穩定性；測定不同批次和存儲后的蛋白的穩定性，并進行相似性評分，對蛋白進行質量控制。
多功能蛋白質穩定性分析儀PSA-16，無需對蛋白進行熒光標記，可以直接測定蛋白在不同緩沖液條件中的Tm值，進行緩沖液篩選和優化；同時還可以測定添加不同配體化合物對蛋白穩定性的影響，通過Tm值變化進行配體結合篩選。PSA-16滿足我們目前對于蛋白質穩定性分析的迫切需求。
★280nm激發光下，蛋白以色氨酸(Trp)釋放的紫外熒光為主
★Trp熒光光譜與其所處微環境密切相關
★折疊狀態Trp在蛋白內部疏水核心；蛋白去折疊后，Trp暴露到溶劑中
★去折疊過程，Trp Emission峰值從330nm轉變到350nm，蛋白紫外熒光發生紅移現象
★350nm與330nm熒光值的比值變化，即可檢測到蛋白去折疊過程
★測定參數：Tm、Ton、Cm、ΔG等
★條件無限制，可測定去垢劑環境中的膜蛋白
蛋白穩定性分析
http://www.best-sciences.cn/SonList-2439554.html
