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由美國BIOTIUM公司技術(shù)專家研發(fā)的GelRed 是兩種集高靈敏、低毒性和超穩(wěn)定于一身的極佳的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過美國環(huán)保局安全認(rèn)定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會造成任何環(huán)境污染。
與標(biāo)準(zhǔn)凝膠成像系統(tǒng)以及可見光激發(fā)的凝膠觀察裝置完美兼容
使用 312nm 激發(fā)的 UV 凝膠成像系統(tǒng)時(shí), GelRed 可以完美的替代 EB ;使用 254nm 激發(fā)的 UV 凝膠成像系統(tǒng)或可見光激發(fā)的凝膠觀察裝置時(shí), GelGreen 足以替代任意一種 SYBR 染料。
Biotium公司的GelRed 和 GelGreen 無論用于預(yù)制凝膠染色還是凝膠電泳后染色,都表現(xiàn)出了極高的靈敏度。為配合312 nm UV 凝膠成像系統(tǒng)而設(shè)計(jì)的 GelRed ,在使用了我們新開發(fā)的具有專利的試驗(yàn)步驟后(該試驗(yàn)步驟中使用稀釋的 NaCl 溶液替代傳統(tǒng)的 TBE 緩沖溶液),在凝膠電泳后染色中優(yōu)于或者至少相當(dāng)于 SYBR Gold 。但與 SYBR Gold不同, GelRed 在預(yù)制凝膠中使用時(shí)仍然有極高的靈敏度,事實(shí)上GelRed 在檢測低濃度、微量 DNA 方面比 EB 表現(xiàn)出更高的靈敏度,尤其對小分子量的 DNA 檢測非常靈敏(圖1)。 GelGreen 可以滿足使用 488 nm 激光凝膠掃描儀或者可見光激發(fā)的 Dark Reader 的研究人員的使用要求。 GelGreen 無論是在預(yù)制凝膠還是凝膠電泳后染色中都與SYBR Green I 靈敏度相當(dāng),但不存在后者的不穩(wěn)定性問題。實(shí)際上, GelRed 和 GelGreen ,特別是 GelRed 非常穩(wěn)定,可以長期在室溫下保存。當(dāng)這兩種染料稀釋在 TBE 或者類似的電泳緩沖溶液中時(shí)甚至可以使用微波爐加熱,便于采用常規(guī)方法制備預(yù)制凝膠。含有染料的預(yù)制凝膠可以成批制備,長期保存。
同樣重要的是, GelRed 和 GelGreen 相比 EB 或 SYBR Green I 提高了安全性。獨(dú)立的測試服務(wù)公司( Litron Laboratories, Inc. )進(jìn)行的標(biāo)準(zhǔn)艾姆斯氏測試結(jié)果表明, 在 18.5 μ g /mL (該濃度遠(yuǎn)高于推薦用于電泳后染色的 約4 μ g/mL 的 3X 染色液)濃度下, GelGreen 沒有誘變性,而 GelRed 也僅在 S9 代謝活化時(shí)有微弱的誘變性。GelRed 和 GelGreen 的特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)使其難以穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,正是這一特性降低了染料的細(xì)胞毒性。如圖3。相反, SYBR Green I 廣泛地用于活細(xì)胞線粒體和核 DNA 染色,這正是由于它能快速的被細(xì)胞吞入。由于已知 SYBR Green I 對紫外線導(dǎo)致的突變有強(qiáng)烈的增強(qiáng)作用( Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001) ),因此它的高細(xì)胞膜透性使它在紫外環(huán)境觀察時(shí)成為凝膠染色的主要有害物質(zhì)。
GelRed產(chǎn)品來源http://www.wissen-bio.com/